【摘 要】
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【目的】优化湖北贝母ISSR-PCR体系,并筛选适用于湖北贝母的多态性引物,为后续湖北贝母的分子辅助育种及遗传多样性和亲缘关系分析等提供科学依据。【方法】采用U12(43)均匀设计和单因素试验结合的方法,获得PCR体系各组分(2×Taq Master Mix,模板DNA,引物)的最佳用量,在此基础上通过梯度退火温度实验探究引物的最佳退火温度。【结果】湖北贝母ISSR-PCR最佳反应体系为:20μL反应体系中,2×Taq Master Mix 10.5μL,模板DNA 0.8μL(40.0 ng),引物2.
【机 构】
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湖北省农业科学院中药材研究所/国家中药材产业技术体系恩施综合试验站/湖北省农业科技创新中心中药材分中心
【基金项目】
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湖北省重点研发计划项目(2020BCA059),湖北省农业科技创新中心2020年重大科技研发项目(2020-620-000-002-04),国家现代农业产业技术体系建设专项(CARS-21),第三批“湖北省青年英才开发计划”项目[鄂青联发(2020)1号],湖北省农业科学院中药材研究所技术创新重大项目(2019ZYCZD01),湖北省中央引导地方科技发展专项资金(2019ZYYD064),湖北省技
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【目的】优化湖北贝母ISSR-PCR体系,并筛选适用于湖北贝母的多态性引物,为后续湖北贝母的分子辅助育种及遗传多样性和亲缘关系分析等提供科学依据。【方法】采用U12(43)均匀设计和单因素试验结合的方法,获得PCR体系各组分(2×Taq Master Mix,模板DNA,引物)的最佳用量,在此基础上通过梯度退火温度实验探究引物的最佳退火温度。【结果】湖北贝母ISSR-PCR最佳反应体系为:20μL反应体系中,2×Taq Master Mix 10.5μL,模板DNA 0.8μL(40.0 ng),引物2.
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