【摘 要】
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以RT-PCR方法扩增目的基因P58^IPK,将其克隆至原核表达质粒pGEX-6p-1。将所构建的pGEX-6p-1-P58^IPK重组质粒转化大肠杆菌Rosetta（DE3）并诱导表达,利用谷胱甘肽-Sepharose 4B亲
【机 构】
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吉林大学畜牧兽医学院,吉林大学人兽共患病研究所教育部人兽共患病重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（30670091）,吉林大学农学部引进人才启动基金（430505010289,430505010286）
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以RT-PCR方法扩增目的基因P58^IPK,将其克隆至原核表达质粒pGEX-6p-1。将所构建的pGEX-6p-1-P58^IPK重组质粒转化大肠杆菌Rosetta（DE3）并诱导表达,利用谷胱甘肽-Sepharose 4B亲和柱进行纯化,所得产物进行SDS-PAGE、Western-blot及体外活性鉴定。结果显示,大肠杆菌细胞经诱导表达出相对分子质量约为85 000的蛋白,与GST-P58^IPK融合蛋白大小相符;Western-blot显示该融合蛋白能够被抗GST的抗体特异性识别,磷酸化试验表明G
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