【摘 要】
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根据GenBank登陆大豆天冬酰胺合成酶（AS-B）基因序列（登录号：GMU55874）设计特异引物,通过PCR扩增从大豆（Glycine max）cDNA中克隆出AS-B基因。将该基因克隆到pET30a（＋）载体,构建重组表达
【机 构】
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东北农业大学生命科学学院,黑龙江农业职业技术学院
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（31000884）, 东北农业大学博士启动基金项目（2012RCB05）, 中国博士后科学基金项目（20110491023）, 黑龙江省博士后科学基金项目（LBH-Z11234）
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根据GenBank登陆大豆天冬酰胺合成酶（AS-B）基因序列（登录号：GMU55874）设计特异引物,通过PCR扩增从大豆（Glycine max）cDNA中克隆出AS-B基因。将该基因克隆到pET30a（＋）载体,构建重组表达载体pET30a-AS,转化大肠杆菌Rosetta（DE3）pLysS,并进行表达条件优化。结果表明,在16℃条件下,经0.5mmol·L-1IPTG诱导14 h,大部分重组AS-B以可溶性蛋白的形式存在。经Ni-NTA亲和层析和Sephadex G50脱盐后,重组蛋白产
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