【摘 要】
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试验以T5、T6代转基因株系JN-hrpZPsta-2004-30-384为试验材料,运用常规PCR、Southern杂交及qRT-PCR技术对T5、T6代大豆株系进行分子检测和稳定性鉴定,然后通过室内人工接灰
【机 构】
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吉林农业大学农学院,长春130118
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试验以T5、T6代转基因株系JN-hrpZPsta-2004-30-384为试验材料,运用常规PCR、Southern杂交及qRT-PCR技术对T5、T6代大豆株系进行分子检测和稳定性鉴定,然后通过室内人工接灰斑病菌CsJ-1的生理小种对其进行抗病性分析.结果 表明:在转基因株系的T5、T6代株系中均检测到转化的目的基因的启动子35S、终止子Nos、目的条带和筛选标记Bar,表明目的基因得到了稳定的遗传;Southern杂交结果显示目的基因均是以多拷贝的形式整合到大豆基因组中,且整合位点不同;qRT-PCR检测结果表明目的基因在植株的根、茎、叶中均有表达,T5代株系的根、茎、叶相对表达量均值分别为2.871,1.363,7.743,T6代株系的根、茎、叶相对表达量均值分别为3.577,1.664,8.589,目的基因在叶中的表达量最高,在茎中表达量最低.按照相关的标准进行抗病性鉴定,结果显示,T5、T6代未转化株系病情指数分别为52.4％、50.6％,属于中感水平,而转化株系病情指数分别为38.7％、38.4％,属于中抗水平,抗病能力得到了提升.
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