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目的:建立乌药水提液的HPLC指纹图谱。方法:采用水加热回流的方法制备供试品溶液,以乙腈-0.1%甲酸水溶液梯度洗脱,检测波长280 nm,建立乌药水提液的HPLC指纹图谱,对不同产地和不同采收期的乌药药材进行相似度评价、主成分分析和聚类分析。结果:方法学考察结果良好,确立了15个共有峰,17批样品指纹图谱中各共有峰的相对保留时间的相对标准偏差(RSD)均小于2%。结论:该方法稳定性、重复性好,建立的指纹图谱可为乌药的质量评价提供依据。