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目的：建立二十九味能消散的质量控制方法。方法：采用TLC对二十九味能消散中肉豆蔻、乳香、大黄、胡椒碱进行了定性鉴别;采用高效液相色谱法测定羟基红花黄色素A的含量。结果：薄层色谱斑点清晰,阴性对照无干扰,专属性强;红花中羟基红花黄色素A的线性范围为10.78～107.8g,r=0.9998,平均加样回收率为98.37%,RSD为1.17%（n=6）。结论：本研究建立的薄层色谱方法及高效液相色谱法专属性强、准确度高、重现性好,可用于二十九味能消散的质量控制。