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靶向整合于MHCC97-H细胞的HBx基因shRNA表达载体的构建和鉴定

来源 :中国医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wushaojunbaobao3
【摘 要】
：
目的构建靶向整合于人肝癌MHCC97-H细胞乙型肝炎病毒x基因（HBx gene）基因的shRNA真核载体。方法依据从人肝癌细胞株MHCC97-H中克隆的HBx基因序列，设计合成X169、X220及MOCK（无关
【作 者】
：
王文龙 孙会卿 杨旭 贺兴鄂 雷建华 童明 
【机 构】
：
中南大学湘雅二医院肝病研究所
【出 处】
：
中国医科大学学报
【发表日期】
：
2008年4期
【关键词】
：
RNA干扰 短发夹RNA 乙型肝炎病毒X基因 MHCC97-H细胞 整合 RNA Interference  shRNA  hepatitis B virus 
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目的构建靶向整合于人肝癌MHCC97-H细胞乙型肝炎病毒x基因（HBx gene）基因的shRNA真核载体。方法依据从人肝癌细胞株MHCC97-H中克隆的HBx基因序列，设计合成X169、X220及MOCK（无关对照）3对寡核酸，经退火成互补双链并克隆至pGenesil—Ⅰ载体；经酶切、PCR和测序鉴定；将鉴定的shRNA质粒脂质体转染MHCC97-H细胞，流式细胞分析转染效率。结果酶切、PCR及测序证实pshRNA-X169／X220／MOCK质粒构建符合设计，转染48h后MHCC97-H细胞可激发绿色
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