【摘 要】
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目的 探讨脂质体介导的内皮抑素(ES)基因转移抑制血管内皮细胞增殖的可行性及ES基因转移对血管内皮细胞增殖的影响.方法利用阳离子脂质体介导的分泌型真核细胞表达载体PCDNA3-ES转染COS-7细胞,并采用免疫斑点杂交法检测转染细胞及其上清液中ES蛋白的表达;以脂质体介导的PCDNA3-ES转染培养的人脐静脉血管内皮细胞(ECV-304细胞),免疫组化染色观察ES蛋白的表达;应用噻唑蓝染色法(MT
【机 构】
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266071,青岛,山东省眼科研究所,266071,青岛,山东省眼科研究所,266071,青岛,山东省眼科研究所,266071,青岛,山东省眼科研究所
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目的 探讨脂质体介导的内皮抑素(ES)基因转移抑制血管内皮细胞增殖的可行性及ES基因转移对血管内皮细胞增殖的影响.方法利用阳离子脂质体介导的分泌型真核细胞表达载体PCDNA3-ES转染COS-7细胞,并采用免疫斑点杂交法检测转染细胞及其上清液中ES蛋白的表达;以脂质体介导的PCDNA3-ES转染培养的人脐静脉血管内皮细胞(ECV-304细胞),免疫组化染色观察ES蛋白的表达;应用噻唑蓝染色法(MTT)观察脂质体介导的ES基因转移并抑制ECV-304细胞增殖的作用;以流式细胞仪检测ES基因转染后对细胞增殖周期的影响.结果重组质粒转染的COS-7细胞及其上清液中均有明显的斑点出现,而以载体质粒转染的细胞则无斑点出现;脂质体介导的ES基因成功转染ECV-304细胞,转染后2 d,ES蛋白表达量达到高峰;ES基因转移可以明显抑制血管内皮细胞增殖,同一观察时间转染与非转染组比较,差异有非常显著意义(P＜0.01);ES基因转染组Go/G1细胞比例增加,S期细胞比例减少.结论脂质体介导ES基因可成功转染血管内皮细胞并有ES蛋白的分泌表达,从而特异性抑制血管内皮细胞的增殖.(中华眼科杂志,2004,40:321-325)
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