【摘 要】
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目的:课题组以前的实验证实,人血管内皮生长因子165基因重组腺病毒可高效感染人骨髓间充质干细胞,使之大量表达人血管内皮生长因子165,促进局部新生血管生成,有利于组织修复.
【机 构】
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郧阳医学院附属人民医院,创伤骨科,湖北省十堰市,442000郧阳医学院附属人民医院,临床医学研究所,湖北省十堰市,442000;
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目的:课题组以前的实验证实,人血管内皮生长因子165基因重组腺病毒可高效感染人骨髓间充质干细胞,使之大量表达人血管内皮生长因子165,促进局部新生血管生成,有利于组织修复.实验观察腺病毒介导人血管内皮生长因子165基因转染对人骨髓间充质干细胞成骨能力的影响.方法:实验于2005-03/2006-01在郧阳医学院附属人民医院临床研究所和创伤骨科完成.人骨髓间充质干细胞取自健康成年男性自愿者,得到医院伦理道德委员会批准.将人骨髓间充质干细胞体外扩增纯化后随机分为4组:①人血管内皮生长因子基因重组腺病毒组.②β-半乳糖酐酶基因重组腺病毒组.③阳性对照组:培养液中添加地塞米松、抗坏血酸和β-甘油磷酸钠.④空白对照组:不给予特殊处理.各组细胞处理后12 d,应用全自动生化分析仪检测各组培养上液碱性磷酸酶活性;于处理后14 d,应用Von Kossa染色法检测人骨髓间充质干细胞中骨胶原结节形成情况.结果:①经多次换液传代,人骨髓间充质干细胞呈均一梭形形态.处理后人血管内皮生长因子基因重组腺病毒组与阳性对照组细胞形态逐渐趋于扁平,突起减少;β-半乳糖酐酶基因重组腺病毒组和空白对照组形态无明显变化.②Von Kossa染色人血管内皮生长因子基因重组腺病毒组与阳性对照组可见大量红色骨胶原结节形成,明显多于β-半乳糖酐酶基因重组腺病毒组和空白对照组.③人血管内皮生长因子基因重组腺病毒组与阳性对照组培养上清碱性磷酸酶活性显著高于β-半乳糖酐酶基因重组腺病毒组和空白对照组(F=165.18,P=0.00).结论:人血管内皮生长因子165基因重组腺病毒基因转染对人骨髓间充质干细胞成骨能力具有促进作用,验证了转染人血管内皮生长因子165的人骨髓间充质干细胞移植治疗骨疾病的可行性.
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