LSPA1早期基因gp22细菌双杂交诱饵载体与筛选文库的建立

来源 :生物技术通报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：tongruanclassone

【摘要】

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构建细菌双杂交系统中的诱饵载体p KT25-gp22和甲型副伤寒沙门氏菌基因文库以便后续的筛选实验。PCR扩增获得gp22基因,插入p KT25构成诱饵质粒p KT25-gp22。提取甲型副伤寒沙

【作者】

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冯梦蝶毛普加洪愉许泽仰赵继华杨洪文宋武战黄芬

【机构】

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昆明理工大学医学院,成都军区昆明总医院核医学科,昆明学院医学院临床检验教研室

【出处】

：

生物技术通报

【发表日期】

：

2015年7期

【关键词】

：

细菌双杂交诱饵载体基因组文库早期基因甲型副伤寒沙门氏菌 bacterial two-hybrid system bait vector geno

【基金项目】

：

国家自然科学基金项目（31160193）, 云南省教育厅科学研究基金项目（2010Y398）, 云南省应用基础研究面上项目（2010ZC055,2012FB135）

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构建细菌双杂交系统中的诱饵载体p KT25-gp22和甲型副伤寒沙门氏菌基因文库以便后续的筛选实验。PCR扩增获得gp22基因,插入p KT25构成诱饵质粒p KT25-gp22。提取甲型副伤寒沙门氏菌基因组DNA,经Sau3AⅠ部分酶切后连接到p UT18C质粒的Bam HⅠ位点,获得基因组DNA表达文库。用化转的方法将诱饵质粒与p UT18C共转入BTH101,检测诱饵质粒自激活作用,并检测诱饵蛋白对宿主菌的毒性。将文库质粒电转至JM109感受态,PCR鉴定文库的多样性。诱饵载体p KT25-gp22

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