论文部分内容阅读
目的对VP3进行克隆和测序后,在杆状病毒系统中表达获得重组蛋白,为AEV的分子诊断以及更深一层次的分子和基因工程研究打下基础。方法利用RT-PCR技术,从AEVVR株感染的SPF鸡胚脑及内脏器官组织中提取病毒RNA并扩增出VP3目的基因,而后克隆到pMD18-T载体中,鉴定后进行序列测定;应用Bae—to-Bac杆状病毒表达系统,将VP3基因定向克隆到pFastBacHTa donor质粒中,经转座反应,筛选到VP3-Bacmid重组子,转染Sf9昆虫细胞并盲传三代,提取DNA应用PCR方法鉴定证实获得含