【摘 要】
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以润楠基因组总DNA为材料,利用单因素试验设计方法,对影响ISSR-PCR扩增的模板DNA、Mg2＋、dNTPs、引物、Taq DNA聚合酶以及去离子甲酰胺等试验因子进行了优化试验,筛选出16条有
【机 构】
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江西农业大学园林与艺术学院,江西省林业科学院国家林业局樟树工程技术研究中心
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以润楠基因组总DNA为材料,利用单因素试验设计方法,对影响ISSR-PCR扩增的模板DNA、Mg2＋、dNTPs、引物、Taq DNA聚合酶以及去离子甲酰胺等试验因子进行了优化试验,筛选出16条有效引物并确定了它们的退火温度,并检测了体系的重复性.优化后的反应体系为：20 μL PCR反应体积中,10×PCR Buffer 2μL,2.0mmol/L Mg2＋ 1.6 μL,0.2 mmol/L dNTPs 2 μL,0.4 mmol/L 引物0.8 μL,0.5U Taq DNA聚合酶0.1
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