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目的:建立柱前衍生高效液相色谱法同时测定复方氨基酸注射液(18AA)中18种氨基酸含量的方法。方法:样品采用异硫氰酸苯酯(PITC)柱前衍生,以Unitary-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,检测波长为254 nm,醋酸钠缓冲盐及乙腈、甲醇和水的混合体系为流动相,梯度洗脱。结果:优化了衍生试剂用量、衍生时间、缓冲盐浓度以及pH值和柱温等影响因素,最终在40 min内实现了18种氨基酸的分离,在9~1 021μg·mL-1浓度范围内线性关系良好,且相关系数大于0.997 7,平均回收率为92.6%~110.7%,相对标准偏差(RSD)为0.01%~5.68%。其定量限(LOQ,S/N=10)为0.02~13.41μg·mL-1。结论:该方法操作简便、灵敏度高、准确度和精密度好,可用于复方氨基酸注射液中氨基酸的含量测定。