【摘 要】
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为了研究大肠杆菌中青霉素G酰化酶(Penicillin G acylase,PAC)成熟的限制性步骤,分别构建了PAC表达质粒pKKpacSP,pETpacSP,并将它们在大肠杆菌宿主中表达.通过酶活性的测定及
【机 构】
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华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,中国科学院上海生物工程研究中心
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为了研究大肠杆菌中青霉素G酰化酶(Penicillin G acylase,PAC)成熟的限制性步骤,分别构建了PAC表达质粒pKKpacSP,pETpacSP,并将它们在大肠杆菌宿主中表达.通过酶活性的测定及Western blotting分析,分别在PAC自身表达系统,Tac,T7及氧调控表达系统中,研究PAC前体蛋白加工成α亚基、β亚基的效率及亚基折叠组装形成活性酶的能力.结果表明:PAC成熟过程中的限制性步骤因宿主/载体系统而异;PAC本身表达系统中,前体肽加工成α亚基、β亚基的效率为57.2%,
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