【摘 要】
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目的：研究不同长度TBX1基因启动子的活性,确定TBX1基因启动子关键区域.方法：①利用聚合酶链反应(Polymerse Chain Reaction,PCR)分离扩增TBX1基因转录起始位点上游不同长度片段,酶切连接至pGL3-Basic报告基因载体,构建含不同长度TBX1基因启动子调控荧光素酶的报告基因;②利用FuGene HD转染试剂将不同长度的TBX1基因启动子调控荧光素酶的报告基因载体瞬
【机 构】
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上海交通大学医学院附属新华医院小儿心血管科 上海交通大学医学院附属新华医院小儿心血管科;上海交通大
【出 处】
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中华医学会第十八次全国儿科学术会议
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目的：研究不同长度TBX1基因启动子的活性,确定TBX1基因启动子关键区域.方法：①利用聚合酶链反应(Polymerse Chain Reaction,PCR)分离扩增TBX1基因转录起始位点上游不同长度片段,酶切连接至pGL3-Basic报告基因载体,构建含不同长度TBX1基因启动子调控荧光素酶的报告基因;②利用FuGene HD转染试剂将不同长度的TBX1基因启动子调控荧光素酶的报告基因载体瞬时转染293T、COS7细胞,42h后经荧光素酶检测,比较不同长度TBX1基因启动子的活性.结果：不同长度TBX1基因启动子活性不同,其中5Kb和1.2Kb的TBX1基因启动子活性较高;TBX1基因启动子在不同细胞中表现的活性不同,COS7细胞中5Kb的基因启动子活性最高,297T细胞中1.2Kb的基因启动子活性最高.结论：TBX1启动子在转录水平上可以驱动报告基因表达,不同长度启动子的活性不同,推测转录起始位点上游1.2Kb区域是TBX1基因启动子关键区域.
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