【摘 要】
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目的 探讨受体MDA5介导poly Ⅰ∶C诱导软骨细胞焦亡的分子机制,为临床治疗骨关节病提供参考. 方法 采用CCK-8法检测细胞增殖;采用流式细胞术分析细胞周期、细胞线粒体膜电位
【机 构】
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成都医学院科研实验中心,四川成都,610500;成都医学院检验医学院;成都医学院基础医学院
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目的 探讨受体MDA5介导poly Ⅰ∶C诱导软骨细胞焦亡的分子机制,为临床治疗骨关节病提供参考. 方法 采用CCK-8法检测细胞增殖;采用流式细胞术分析细胞周期、细胞线粒体膜电位及细胞凋亡率;采用Real Time-PCR测定软骨细胞经poly Ⅰ∶C作用后相关炎性基因的表达水平. 结果 poly Ⅰ∶C抑制软骨细胞的增殖并呈时间及剂量依赖性,其中24 h、48 h的IC50分别为1.1 μg/ml和0.7 μg/ml;将细胞阻滞在sub-G0期,引起线粒体膜电位下降;显著诱导炎性细胞因子IL-6、IL-8、IL-33、TNF-α基因高表达,表达差异具有统计学意义(P＜0.05);激活细胞炎性死亡相关Caspase-1、NLRP3、IL 1β、IL-18基因表达显著升高(P＜0.05);poly I:C作用后,胞内受体MDA5高表达,为对照组的118倍,提示其可能参与软骨细胞的增殖调控及细胞焦亡过程. 结论 poly Ⅰ∶C转染软骨细胞后与MDA5受体结合,激活其下游的信号通路,促进炎症因子的转录,降低线粒体膜电位、阻滞细胞周期,进而抑制软骨细胞增殖、诱导细胞焦亡.
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