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根据同源序列克隆原理设计一对引物,以绵羊脑组织总RNA的反转录产物为模板,利用RT—PCR扩增绵羊N0ggin基因cDNA全长编码区,克隆到pMD-18T载体。测序验证后,提取pT—Noggin质粒经BamHI和XhoI双酶切回收目的条带,亚克隆到pET41a原核表达载体,转化BL21(DE3)菌,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定表达产物。序列分析表明,绵羊Noggin基因的eDNA全长编码区(OenBank登录号为FJ751853)为699bp,编码232个氨基酸,与其