【摘 要】
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【背景】碱性蛋白酶是众多芽胞杆菌的发酵产物，是工业上极其重要的一类酶。【目的】利用酪素培养基从环境样品中筛选出一株产碱性蛋白酶的菌株，对传代次数、发酵的碳源、氮源、金属离子、磷酸盐、初始pH、接种量和温度进行优化，提高其产碱性蛋白酶的能力并降低发酵成本。【方法】采用革兰氏染色法、扫描电镜、生理生化试验、16S rRNA基因序列对分离的菌株进行鉴定；采用单因素试验、Plackett-Burman试验
【基金项目】
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中央高校基本科研业务费项目（31920210126）； 甘肃省自然科学基金（21JR1RA197）； 甘肃省科技厅“科技助力经济2020”重点专项（SQ2020YFF0405583）； 甘肃省教育厅优秀研究生创新之星项目（2021CXZX-682）；
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【背景】碱性蛋白酶是众多芽胞杆菌的发酵产物，是工业上极其重要的一类酶。【目的】利用酪素培养基从环境样品中筛选出一株产碱性蛋白酶的菌株，对传代次数、发酵的碳源、氮源、金属离子、磷酸盐、初始pH、接种量和温度进行优化，提高其产碱性蛋白酶的能力并降低发酵成本。【方法】采用革兰氏染色法、扫描电镜、生理生化试验、16S rRNA基因序列对分离的菌株进行鉴定；采用单因素试验、Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验和响应面试验优化碱性蛋白酶的发酵条件，使用Minitab对试验数据进行分析。【结果】经鉴定分离菌株为地衣芽胞杆菌，命名为Bacillus licheniformis NWMCC0046。优化后的发酵培养基组成为：豆粕50 g/L，葡萄糖10 g/L，酵母浸膏13.46 g/L，CaCl2 0.5 g/L，Na2HPO4·12H2O 4 g/L，KH2PO4 0.3 g/L；优化后的培养条件为：pH 7.5，温度34.81 ℃，接种量4.13%。在此条件下，摇瓶发酵48 h时碱性蛋白酶活性达到165.41 U/mL，较优化前提高了8.04倍。【结论】通过发酵培养基组成和条件优化有效提高了地衣芽胞杆菌产碱性蛋白酶的能力，为碱性蛋白酶的后续研究提供了参考。
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