【摘 要】
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目的探讨低频超声对细胞基因转染的作用。方法超声治疗仪频率1MHz,脉冲重复频率100Hz,占空系数20%。质粒DNA为含编码绿荧光蛋白的pEGFP。应用荧光显微镜和流式细胞仪评价细胞
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属同济医院超声影像科; Department of Imaging Clinical Sciences Centre; Imperial College;
【基金项目】
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国家留学回国人员科研启动基金(教外司留[2005]383号);国家自然科学基金项目(30670620)
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目的探讨低频超声对细胞基因转染的作用。方法超声治疗仪频率1MHz,脉冲重复频率100Hz,占空系数20%。质粒DNA为含编码绿荧光蛋白的pEGFP。应用荧光显微镜和流式细胞仪评价细胞基因转染率,台盼蓝染色计算细胞成活率。选用C2C12、3T3-MDEI和CHO3种细胞系为研究对象,加入DNA后辐照不同声强、时间或加入超声造影剂,观察各条件下的细胞基因转染率和成活率。结果①超声介导的基因转染与声强和辐射时间有关,最佳剂量为1W/cm220s;②同样超声剂量,较高的声强较早达到最大基因转染率;③较低剂量时,微泡造影剂可使超声介导的基因转染提高2~3倍并可显著提高最高基因转染率。结论低频超声可介导细胞基因转染,基因转染率不但与超声辐射剂量有关,而且同样剂量时,高声强较早达到最大基因转染率,最佳剂量是1W/cm220s。同时,微泡造影剂可提高超声介导基因转染的最高转染率。
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