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采用酚一蛋白酶K抽提和氯化锂沉淀法,从10g黑曲霉细胞中获得8mg总RNA,经二次寡聚(dT)-纤维素亲和层析纯化得60μg poly(A)~+mRNA。经紫外分光,6M尿素—琼脂糖凝胶电泳分析及体外翻译试验结果证明:纯化的poly(A)~+mRNA的纯度及完整性好,无降解并具翻译活性。以纯化的poly(A)~+mRWA为模板,以寡聚(dT)_(12-18)及随机的寡聚核苷酸为引物,用AMV反向转录酶合成了第一链cDNA。用RNaseH及DNA聚合酶Ⅰ水解模板mRNA并合成双链cDNA。第一链及第二链cD