【摘 要】
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目的 研究母系表达基因3(MEG3)对上皮性卵巢癌细胞埴殖影响及其作用机制.方法 逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测67例人上皮性卵巢癌组织和20例正常卵巢组织中MEG3表达.实验设置MEG3过表达质粒组(MEG3组)和空质粒pcDNA3.1对照组(NC组).过表达MEG3质粒转染卵巢癌细胞OVCAR3和SKOV3,MTT实验、细胞周期和细胞凋亡实验检测MEG3对卵巢癌细胞生长的影响;双荧光素酶报告系统检测MEG3靶基因Rb1的转录活性;RT-PCR和蛋白质印迹法检测Rb1 mRNA和蛋白表达水平.
【机 构】
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广州医科大学附属第三医院妇科,广东省产科重大疾病重点实验室,广东省普通高校生殖与遗传重点实验室,广东 广州 510150
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目的 研究母系表达基因3(MEG3)对上皮性卵巢癌细胞埴殖影响及其作用机制.方法 逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测67例人上皮性卵巢癌组织和20例正常卵巢组织中MEG3表达.实验设置MEG3过表达质粒组(MEG3组)和空质粒pcDNA3.1对照组(NC组).过表达MEG3质粒转染卵巢癌细胞OVCAR3和SKOV3,MTT实验、细胞周期和细胞凋亡实验检测MEG3对卵巢癌细胞生长的影响;双荧光素酶报告系统检测MEG3靶基因Rb1的转录活性;RT-PCR和蛋白质印迹法检测Rb1 mRNA和蛋白表达水平.结果 正常卵巢组织中MEG3表达量为3.32±0.25,上皮性卵巢癌组织为0.35±0.11,差异有统计学意义,t=10.932,P<0.001.转染MEG3过表达质粒后,12、24、36和48 h的OVCAR3和SKOV3细胞生长抑制率分别为(37.26±2.21)％和(23.06±1.67)％、(38.19±1.98)％和(42.71±2.36)％、(44.30±2.14)％和(44.31±3.38)％、(47.67±4.32)％和(50.36±2.76)％,差异有统计学意义,F值分别为131.203和353.782,均P<0.001;转染MEG3过表达质粒后OVCAR3和SKOV3细胞S期比例下降,差异有统计学意义(t=7.471,P<0.001;t=5.197,P<0.001);OVCAR3和SKOV3细胞凋亡率增加,差异有统计学意义(t=6.820,P=0.029;t=4.235,P<0.001).对比NC组,MEG3组Rb1转录活性增加,OVCAR3和SKOV3细胞Rb1 mRNA表达分别增加(1.74±0.54)和(1.95±0.72)倍,差异有统计学意义(t=24.504,P<0.001;t=28.276,P<0.001);OVCAR3和SKOV3细胞Rb1蛋白表达分别增加(1.92±0.32)和(1.75±0.25)倍,差异有统计学意义(t=10.500,P<0.001;t=9.375,P<0.001).结论 MEG3在上皮性卵巢癌组织和细胞中表达降低,推测可能与上皮性卵巢癌的发生发展相关.MEG3可能通过调控Rb1抑制上皮性卵巢癌细胞增殖并促进凋亡.
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