红花MYB转录因子基因克隆及表达分析

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红花是菊科一年生草本植物红花(Carthamus tinctorius L.)的干燥花,为活血化瘀常用中药。黄酮类成分是红花主要有效成分,MYB转录因子广泛参与调控黄酮类成分的合成,对红花MYB转录因子克隆及表达分析为解析红花黄酮类成分的调控机制、调控黄酮类成分的合成具有重要意义。本研究基于在线二代转录组数据,首先利用i TAK软件对MYB转录因子进行注释,设计引物对长片段MYB转录因子基因进行克隆,其次对克隆到的MYB转录因子基因进行序列分析,再次利用实时荧光定量PCR对克隆的MYB转录因子基因表达进行分析。注释筛选得到8个长片段MYB转录因子基因,成功克隆到6个MYB转录因子基因,分别命名为Ct MYB-TF1、Ct MYB-TF2、Ct MYB-TF4、Ct MYB-TF5、Ct MYB-TF6及Ct MYB-TF7。序列分析表明,克隆到的6个MYB转录因子基因都具有MYB转录因子核心结构域,其中Ct MYB-TF7转录因子同已报道黄酮类成分合成调控因子At MYBL2及At MYB12关系较近。表达分析表明,Ct MYB-TF5、Ct MYB-TF6及Ct MYB-TF7在根、茎及叶中表达量低,在花中表达量高。研究结果为进一步研究红花黄酮类成分的分子调控奠定基础。
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