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本文介绍了用酶促合成制备高比度[γ-32P]ATP的方法及其应用鉴定结果。该法原理是以1-α-甘油磷酸为底物,在其酶促转化为3-磷酸甘油酸过程中,ADP进行底物水平的磷酸化与外源的32P合成[γ-32P]ATP。反应中与酵解速率相适应的NAD+的再生是由乳酸脱氢酶催化的反应来完成的。酶促合成转化率(相对投料的32P强度)可达90%以上。经高压液相色谱分析,[γ-32P]ATP的放化纯可达95%左右。与英国Amersham产品(>5000Ci/mM)在相同条件下进行比较,结果相同。本方法具有简便、高效,放射性操作少的特点。