【摘 要】
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目的 探讨神经源性丝氨酸蛋白酶抑制剂(neuroserpin,NSP)对急性缺血性脑卒中时使用重组人组织型纤溶酶原激活物(tissue plasminogen activator,tPA)治疗的影响和机制.方法 构造大鼠大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型.将大鼠随机分为假手术组、MCAO组、1h tPA组(再灌注1h MCAO+tPA)、lh tPA+NSP组(再灌注1h MCAO+tPA+NSP)、4 htPA组(再灌注4h MCAO +tP
【机 构】
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上海市浦东新区公利医院神经内科,上海200135
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目的 探讨神经源性丝氨酸蛋白酶抑制剂(neuroserpin,NSP)对急性缺血性脑卒中时使用重组人组织型纤溶酶原激活物(tissue plasminogen activator,tPA)治疗的影响和机制.方法 构造大鼠大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型.将大鼠随机分为假手术组、MCAO组、1h tPA组(再灌注1h MCAO+tPA)、lh tPA+NSP组(再灌注1h MCAO+tPA+NSP)、4 htPA组(再灌注4h MCAO +tPA)及4 htPA+NSP组(再灌注4 h MCAO+tPA+NSP).采用改良神经严重性评分(modified neurologic severity score,mNSS)、Rota-Rod电机测试评估大鼠神经功能改变,采用干湿法和TTC染色评估大鼠脑水肿和脑梗死面积,采用伊文思蓝染色法、苏木精-伊红(Hematoxylin Eosin,HE)染色法检测大鼠血脑屏障完整性,采用酶联免疫吸附试验法检测脑组织丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)的表达,采用蛋白质印迹法和甲苯胺蓝染色检测脑组织中半胱门冬氨酸蛋白酶(cysteinyl aspartate specific proteinase,Caspase)-3、B细胞淋巴瘤因子-2(B-cell lymphoma factor 2,Bcl-2)的表达以及脑组织细胞凋亡情况.结果 mNSS结果显示,lh tPA+NSP组及4 h tPA+NSP组(联合干预组)分别低于l h tPA组和4 htPA组(P＜0.05).Rota-Rod电机测试结果显示,各联合干预组分别长于l htPA组和4 htPA组(P＜0.05).各联合干预组脑水肿体积和脑梗死面积均优于相同再灌注时间单纯tPA干预组.各联合干预组MDA含量低于相同再灌注时间单纯tPA干预组(P＜0.05),各联合干预组SOD及GSH-Px活性高于相同再灌注时间单纯tPA干预组(P＜0.05).各联合干预组Caspase-3表达低于相同再灌注时间单纯tPA干预组(P＜0.05).各联合干预组Bcl-2表达高于相同再灌注时间单纯tPA干预组(P＜0.05).结论 NSP可以改善tPA干预后引起的神经功能缺损,其机制可能是NSP减弱了脑缺血时血脑屏障的损伤和氧化应激反应.
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