抗氯霉素单链抗体基因的表达及免疫学活性初探

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目的:构建和原核表达抗氯霉素(CAP)的单链抗体基因,并进行免疫学活性的初步测定。方法:通过柔性连接肽(G4S)3,将成功克隆出的氯霉素单抗4B12的重、轻链可变区基因(VH和VL)组装成CAP-SCFV,并在5'和3'引入相应的酶切位点,克隆到pET-22b(+)后转化入E.coliBL21的工程菌;分别在25℃和37℃诱导表达,SDS-PAGE电泳和间接ELISA分析表达的目的蛋白和纯化后的免疫活性。结果:经酶切鉴定,DNA测序分析和NCBI比较,证明基因构建正确,轻链为鼠源κ链,所得单链抗体具有功能
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