人博卡病毒相关基因的克隆与表达

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目的克隆临床标本中人博卡病毒相关功能基因,进而在原核表达体系中表达博卡病毒相关的蛋白。方法采用分子生物学技术构建重组质粒PGEX-20T-VP、PGEX-20T-NP和PGEX-20T-NS,分别对其进行PCR、双酶切和测序鉴定,然后将已测序鉴定的包含3种重组质粒的工程菌,转化至大肠杆菌BL21菌中表达博卡病毒VP、NP和NS部分基因的相关蛋白。结果成功的构建了人博卡病毒3种相关功能基因重组质粒,并在大肠杆菌中表达了VP、NP和NS部分基因的相关蛋白。结论原核体系中表达出来的博卡病毒VP、NP和NS部分基因的相关蛋白将为下一步抗原纯化、单抗制备及博卡病毒检测奠定基础。
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