【摘 要】
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为了研究β-胡萝卜素加酮酶基因在南瓜中合成酮基类胡萝卜素的功能,本研究采用农杆菌介导瞬时表达技术,将含有衣藻β-胡萝卜素加酮酶基因CrBKT的pBI121-CMTPCRBKT载体和pBI121对照载体的农杆菌菌液注入授粉后2、5、10、15和25天的南瓜果实中,OD600值为0.3～0.5,3天后观察发现转化2天和5天果实果肉呈微红,其中5天果实颜色较深,且果实表型比率最高,而10天以上果实无红色
【机 构】
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广东省农业科学院蔬菜研究所,广州510640;华中农业大学园艺林学学院,武汉430070 广东省农
【出 处】
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广东省园艺学会第十一届会员大会暨广东园艺产业创新与发展学术研讨会
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为了研究β-胡萝卜素加酮酶基因在南瓜中合成酮基类胡萝卜素的功能,本研究采用农杆菌介导瞬时表达技术,将含有衣藻β-胡萝卜素加酮酶基因CrBKT的pBI121-CMTPCRBKT载体和pBI121对照载体的农杆菌菌液注入授粉后2、5、10、15和25天的南瓜果实中,OD600值为0.3～0.5,3天后观察发现转化2天和5天果实果肉呈微红,其中5天果实颜色较深,且果实表型比率最高,而10天以上果实无红色色素积累,经高效液相色谱(HPLC)分析色素成分,发现积累的红色色素为酮基类胡萝卜素角黄素和虾青素,与对照相比,注射了CrBKT基因的2天和5天幼果中的类胡萝卜素含量显著增加,5天幼果的类胡萝卜素含量增加了约1/3,且含有106.31μg?g-1酮基类胡萝卜素,其中角黄素占80.65％,虾青素为19.35％,而生长10天以上果实的类胡萝卜素含量没有明显变化也没有酮类胡萝卜素的积累;且PCR扩增表明转化组织中表达了该基因.结果表明,CrBKT基因只能在5天以下幼果中表达,并将幼果中的类胡萝卜素转化为酮基类胡萝卜素;随着果实成熟,菌液在南瓜果肉组织中无法渗透而阻碍基因表达.
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