【摘 要】
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利用IBV全长S1基因特异性引物,以纯化的3个标准株M41、H52、T和6个地方分离株(QD、ZZ、GZ、TJ、DL和YC)的基因组RNA为模板,用RT-PCR方法扩增出预期大小约1.73kbcDNA片段,经BA
【机 构】
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上海市农业科学院畜牧兽医研究所,上海,201106中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,哈尔滨,150001;
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利用IBV全长S1基因特异性引物,以纯化的3个标准株M41、H52、T和6个地方分离株(QD、ZZ、GZ、TJ、DL和YC)的基因组RNA为模板,用RT-PCR方法扩增出预期大小约1.73kbcDNA片段,经BAMHI和HindIII酶切插入到质粒pUC18中,并在大肠杆菌JM83中实现了克隆.对6个分离株的S1基因PCR产物进行HaeIIIRFLP分析,表明QD、TJ属于M41基因型,ZZ和GZ与T基因型一致;而DL、YC表现为不同的基因型,这一结果与血清中和实验结果基本吻合,证实我国IBV流行株已发生基因变异.
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