【摘 要】
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目的 探讨β-连环蛋白(β-catenin)和Yes相关蛋白(YAP)在Klotho蛋白调节硫酸吲哚酚(IS)诱导巨噬细胞极化中的作用.方法 THP-1细胞经丙二醇甲醚醋酸酯处理诱导成THP-1源巨噬细胞,构建Klotho过表达质粒,转染THP-1源巨噬细胞并分为4组.(1)对照组:转染未经处理的pIRES2-ZsGreen1质粒;(2)对照+IS组:转染未经处理的pIRES2-ZsGreen1质粒,并予IS(2 mmol/L)干预;(3)过表达组:转染构建的Klotho过表达质粒;(4)过表达+IS组:
【机 构】
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310013 杭州,浙江医院全科医学科
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目的 探讨β-连环蛋白(β-catenin)和Yes相关蛋白(YAP)在Klotho蛋白调节硫酸吲哚酚(IS)诱导巨噬细胞极化中的作用.方法 THP-1细胞经丙二醇甲醚醋酸酯处理诱导成THP-1源巨噬细胞,构建Klotho过表达质粒,转染THP-1源巨噬细胞并分为4组.(1)对照组:转染未经处理的pIRES2-ZsGreen1质粒;(2)对照+IS组:转染未经处理的pIRES2-ZsGreen1质粒,并予IS(2 mmol/L)干预;(3)过表达组:转染构建的Klotho过表达质粒;(4)过表达+IS组:转染Klotho过表达质粒并予IS(2 mmol/L)干预.4组细胞采用流式细胞术检测M1极化标志物HLA-DR和M2极化标志物CD206,qRT-PCR法检测β-catenin和YAP mRNA表达水平,Western blot法检测β-catenin、YAP和磷酸化YAP(p-YAP)蛋白表达水平,细胞免疫荧光染色法检测β-catenin、YAP入核率.结果 与对照组比较,对照+IS组HLA-DR标记的阳性细胞百分比明显增加(P0.05);与对照+IS组比较,过表达+IS组HLA-DR标记的阳性细胞百分比明显减少(P<0.01),而CD206标记的阳性细胞百分比明显增加(P<0.01).与对照组比较,对照+IS组β-catenin mRNA及蛋白表达水平均明显降低,入核率明显下降(均P<0.01);而与对照+IS组比较,过表达+IS组β-catenin mRNA及蛋白表达水平均升高,入核率增加(均P<0.05).与对照组比较,对照+IS组YAP蛋白表达水平明显升高,p-YAP蛋白表达水平明显降低,YAP入核率增加(均P<0.01);与对照+IS组比较,过表达+IS组YAP蛋白表达水平明显降低(P<0.01),p-YAP蛋白表达水平升高(P<0.05).结论 Klotho可通过β-catenin通路抑制IS诱导的巨噬细胞极化.
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非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是临床最常见的慢性肝病,与肥胖及相关代谢紊乱密切相关.减重是治疗NAFLD最主要的方法,其中以饮食控制和适度运动为主的生活方式干预是治疗NAFLD的基石,但患者一般依从性较差;药物减重存在不少不良反应,而代谢外科手术虽然减重效果较好,但创伤较大、费用较高;近年来,内镜减重逐步应用于NAFLD的治疗.本文就不同内镜减重方法治疗NAFLD的进展与挑战作一述评.
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