红色糖多孢菌红霉素抗性基因的克隆与鉴定

来源 :华东理工大学学报：自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：lifei111

【摘要】

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将红色糖多孢菌（Saccharopolyspora erythraea）的染色体DNA用PsTi酶切后与载体PUWL201连接，转化变沿青链霉菌（S.lividans)TK23的原生质体。采用双重抗性筛选得到了9个转化子。分

【作者】

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孙丽萍沈琼等

【机构】

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华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室

【出处】

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华东理工大学学报：自然科学版

【发表日期】

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2002年1期

【关键词】

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鸟枪法原生质体转化红色糖多孢菌红霉素抗性基因双重抗性筛选基因克隆基因鉴定 shotgun protoplast transformation S

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将红色糖多孢菌（Saccharopolyspora erythraea）的染色体DNA用PsTi酶切后与载体PUWL201连接，转化变沿青链霉菌（S.lividans)TK23的原生质体。采用双重抗性筛选得到了9个转化子。分别抽提其中的质粒并再次转化原生质体，在含红霉素的平板上各筛选约200个转化子，其中3个在抗性板上生长良好，分别命名为PLP42、PLP1b和PLP44。对其中的PLP42酶切分析表明，其含有约3.0Kb的红色糖多孢菌（Saccharopolyspora erythraea）染色体DNA

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