【摘 要】
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为了研究巴西固氮螺菌（Azospirillum brasilense）在植物体内的定殖,利用酶切连接的方法,以增强型绿色荧光蛋白（enhanced green fluorescent protein,EGFP）基因与表达载体p VLT-33
【机 构】
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河南省科学院生物研究所有限责任公司
【基金项目】
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2013年河南省基础前沿项目“巴西固氮螺菌定殖及其促生长机理研究”（132300413219）, 2012年河南省重大科技专项“新型复合微生物肥料关键技术研究及产业化”（121100110100）, 2013年省级科技基础平台建设专项经费项目“新型农业微生物菌剂的研制及应用”[豫财政（2013）435号], 2014年河南省科学院预研项目“固氮芽孢杆菌的筛选及其竞争适应能力研究”
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为了研究巴西固氮螺菌（Azospirillum brasilense）在植物体内的定殖,利用酶切连接的方法,以增强型绿色荧光蛋白（enhanced green fluorescent protein,EGFP）基因与表达载体p VLT-33为基本元件,构建了重组表达载体p VLT-EGFP,电转巴西固氮螺菌R7细胞,并利用实时荧光定量PCR（q PCR）研究了不同温度、不同时间EGFP m RNA的表达情况。酶切及测序结果表明,成功构建了p VLT-EGFP载体,并在荧光显微镜下观察到绿色荧光蛋白表达;q
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