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目的:初步证实咖啡豆α-半乳糖苷酶基因在大肠杆菌JM83中可溶性表达、纯化及活性。方法:通过PCR扩增得到咖啡豆”半乳糖苷酶基因克隆到载体pGEM-Teasy,目的片段与预期的大小一致。咖啡豆α-半乳糖苷酶基因与分泌性原核表达载体pASl8连接,转化到宿主菌E.coli JM83。经过IPTG诱导表达并通过SDS-PAGE电泳分析,Western—blot印迹证实蛋白表达的特异性。结果:PCR扩增得到目的片段测序结果正确。SDS-PAGE电泳分析得到目的蛋白41kD,经过Western blot鉴定正确。