【摘 要】
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含IBDV保护性抗原VP2的质粒,以SphⅠ消化,然后用T4噬菌体DNA聚合酶将末端补平,产物纯化后再以SalⅠ消化一次,经再次纯化后与SmaⅠ和SalⅠ分步酶切的鸡痘病毒插入载体pFG1175-
【机 构】
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中国农业大学农业生物技术国家重点实验室,北京100094
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含IBDV保护性抗原VP2的质粒,以SphⅠ消化,然后用T4噬菌体DNA聚合酶将末端补平,产物纯化后再以SalⅠ消化一次,经再次纯化后与SmaⅠ和SalⅠ分步酶切的鸡痘病毒插入载体pFG1175-1相连,使VP2基因顺向插入到栽体P75启动子下游,得到含IBDV VP2基因的重组插入载体pFG VP2.将该质粒用脂质体介导转染,用禽痘病毒疫苗株FPV282 E4感染3～4 h的鸡胚成纤维细胞,经多次蓝斑纯化后,得到稳定的重组病毒,间接免疫荧光法证明,重组病毒在细胞中表达了IBDV VP2.
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