【摘 要】
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目的 本文旨在构建11β-羟基类固醇脱氢酶2 (11β-HSD2)基因的重组真核表达载体,并检测其转染入哺乳动物细胞后对白介素6(interleukin-6,IL-6)表达水平的影响.方法 用PCR方法扩增11β-HSD2基因的全长cDNA,先亚克隆至pGMT载体,测序正确后再亚克隆至pcDNA3.1 myc-hisC 以构建其重组真核表达载体.将重组的真核表达载体瞬时转染人肺腺癌细胞系A549,
【机 构】
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100700北京军区总医院呼吸内科,100044北京交通大学理学院生命科学与生物工程研究院,100700北京军区总医院呼吸内科,100700北京军区总医院呼吸内科,100044北京交通大学理学院生命科
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目的 本文旨在构建11β-羟基类固醇脱氢酶2 (11β-HSD2)基因的重组真核表达载体,并检测其转染入哺乳动物细胞后对白介素6(interleukin-6,IL-6)表达水平的影响.方法 用PCR方法扩增11β-HSD2基因的全长cDNA,先亚克隆至pGMT载体,测序正确后再亚克隆至pcDNA3.1 myc-hisC 以构建其重组真核表达载体.将重组的真核表达载体瞬时转染人肺腺癌细胞系A549,用Western blot 方法鉴定表达情况,并用ELISA方法检测IL-6表达水平.结果 测序表明11β-HSD2的重组真核表达载体构建成功,Western blot显示真核表达载体能够在A549细胞中成功表达,并可使IL-6表达水平升高.结论成功构建了11β-HSD2基因的重组真核表达载体,初步验证了该基因的促炎效应。
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