Eupenicillium sp.UN88胞内活性物质的鉴定及含量测定

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采用液相色谱-质谱联用技术对Eupenicillium sp.UN88胞内活性物质进行定性鉴别,以高效液相色谱法测定其含量.色谱条件:色谱柱为Kromail C18 (4.6mm×250mm,5μm),以甲醇∶水(60∶40,V/V)为流动相,流速1.0mL/min,检测波长230nm,柱温30℃.采用ESI-MS总离子流跟踪分析HPLC的洗脱液,并用低能量CID-MS-MS及CID-MS-MS-MS进一步确定目标离子峰.结果表明Eupenicillium sp.UN88胞内主要产布雷菲德菌素A(BFA).BFA在0.1-5.0mg/mL浓度范围内呈良好的线性关系(r=0.9999,n=6),平均回收率为100.6%,RSD为1.3%(,n=9),检出限为0.3μg/mL.因此,Eu penicillium sp.UN88发酵产生具有活性的胞内次级代谢产物与BFA同质;建立检测BFA的RP-HPLC快速、简便、准确可靠,为筛选BFA的高产菌和质量监测提供可靠依据.
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