【摘 要】
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目的:探讨CPEB4对慢性髓系白血病细胞K562迁移与周期的影响及可能参与机制调控的蛋白分子的变化.方法:采用Western blot检测正常白细胞和K562细胞中CPEB4的表达水平;再将过表
【机 构】
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泰安市立医院检验科,山东泰安271000广州医科大学附属第二医院,广东广州510000;山西医科大学汾阳学院,山西汾阳032200;
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目的:探讨CPEB4对慢性髓系白血病细胞K562迁移与周期的影响及可能参与机制调控的蛋白分子的变化.方法:采用Western blot检测正常白细胞和K562细胞中CPEB4的表达水平;再将过表达质粒pcDNA3.1(+)-His-CPEB4、沉默质粒pPLK+Puro-CPEB4 shRNA电穿孔转染K562细胞,改变CPEB4在K562细胞中的表达量,利用Western blot检测转染效率;最后利用Transwell小室、流式细胞术检测不同处理细胞的迁移、周期情况,并用Western blot检测MMP2、MMP9、CDK4、CyclinD1、P21蛋白的表达变化.结果:与正常白细胞相比,K562细胞中的CPEB4蛋白表达量明显升高(P＜0.01);CPEB4沉默的K562细胞与对照组相比,细胞的迁移能力显著提高(P＜0.01);G0/G1期细胞比例减少,G2/M期细胞比例增加,细胞周期进程加快(P＜0.01);MMP2(P＜0.05)、MMP9(P＜0.05)、CDK4(P＜ 0.01)、CyclinD1蛋白表达水平明显增加(P＜0.01),P21蛋白表达显着降低(P＜0.01).CPEB4过表达后K562细胞迁移能力明显下降(P＜0.01);细胞周期中G0/G1期细胞比例增加,S期比例降低,细胞周期进程阻滞于G0/G1期(P＜0.01);P21蛋白表达明显增加,MMP2、MMP9、CDK4、CyclinD1蛋白表达均显著降低(P＜ 0.05-0.01).结论:CPEB4可抑制K562细胞迁移,将细胞周期进程阻滞于G0/G1期;CPEB4影响K562细胞周期和迁移可能是通过调控MMP2、MMP9、CDK4、CyclinD1、P21等分子的表达完成的.
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