论文部分内容阅读
【摘要」目的探讨紫檀茂( pterostilbene)对长波紫外线(UVA)辐射所致的人成纤维细胞 急性损伤的保护作用，初步分析其分子机制。方法MTT法测定紫檀茂对人皮肤 成纤维细胞活力的影响，紫檀茂与人皮肤成纤维细胞共培养24h后，以20J/c耐的 UVA剂量进行照射，然后采用乳酸脱氢酶释放法测定细胞活力，DCFH-DA测定胞 内活性氧( cellular reactive oxygen species , ROS)水平，彗星实验检测DNA损伤， Western印迹检测核因子N F-E2相关因子2 ( nuclear factor erythroid 2-related factor 2 , Nrf2)蛋白细胞定位以及siRNA沉默Nrf2。结果与对照相比，UVA照射后乳 酸脱氢酶相对释放率增加为164. 53 % ( P < 0. 001)。而UVA照射前4 }.},mo1/ L和 8 }.},mol儿紫檀茂预处理细胞24h，则细胞乳酸脱氢酶相对释放率分别恢复到对照 组的100. 11 % ( P > 0. OS)和98. 69 % ( P > 0. OS )。流式细胞术分析显示，经UVA 辐照后，其ROS水平上升至对照细胞的264.4% ( P < 0. 001) , UVA照射前4 }.},mol/ L 紫檀茂预处理细胞24h，则活性},(ROS)水平恢复至对照细胞的113. 50% ( P < 0. OS )。彗星实验结果显示，空白对照组细胞的尾部DNA百分比为(1. 795 1 2. 147)% ,UVA辐照组为(65.50112.418)%，与空白对照组相比DNA损伤显著 增加(t = 40. 68 , P < 0. 000 1);而紫檀茂预处理后再接受UVA辐照组为(13. 53 1 8. 152) %，与UVA辐照组相比其DNA损伤显著减轻(t=27.85 ,P <0.000 1) o紫 檀茂处理提高了细胞核中的Nrf2蛋白水平。转染siRNA-Nrf2后，细胞活性与对 照细胞差异无统计学意义(P>0.05)，但经UVA照射，紫檀茂的预处理细胞活性 为对照组的35. 32% ( P < 0. 000 1) ,紫檀茂的保护作用显著降低。结论紫檀茂 能有效防御UVA所致成纤维细胞急性光损伤。这种保护作用可能与紫檀茂激活 Nrf2信号通路相关。