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抗CD20融合蛋白在CHO细胞中的表达及其纯化与鉴定

来源 :生物技术通讯 | 被引量 : 0次 | 上传用户：youzhangyale

【摘要】

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目的：构建CD20胞外区与Igβ胞外区和人IgG1 Fc融合基因的表达载体，并在CHO细胞中表达。方法与结果：根据已知的IgM的CH2区域和Igp胞外区序列，分别设计PCR引物并进行PCR扩增，然后用

【作者】

：

赵子兰邵勇高丽华张连成胡显文陈惠鹏

【机构】

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军事医学科学院生物工程研究所,沈阳药科大学生命科学与生物制药学院

【出处】

：

生物技术通讯

【发表日期】

：

2012年6期

【关键词】

：

CD20 B细胞淋巴瘤融合蛋白 CD20 B-cell lymphoma fusion protein

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目的：构建CD20胞外区与Igβ胞外区和人IgG1 Fc融合基因的表达载体，并在CHO细胞中表达。方法与结果：根据已知的IgM的CH2区域和Igp胞外区序列，分别设计PCR引物并进行PCR扩增，然后用重叠PCR法扩增得到900bp的Igp-CH2序列，插入本实验室构建的pIRIS-EGFP-Fc载体，转化大肠杆菌，得到pIRIS-Igβ-CH2-Fc重组质粒，将其转染CHO-K1细胞，在G418抗性培养基中培养，荧光显微镜观察结合ELISA法筛选高表达细胞系，细胞系扩大培养后，通过亲和层析rProtein

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