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目的:构建抗结核分枝杆菌(TB)DNA疫苗并进行体内外的鉴定。方法:采用PCR技术分别扩增TB(H37Rv)抗原单基因Ag85a、Ag85b以及融合基因Ag85a-Esat6和Ag85b-Esat6融合基因,其5'端均含人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)信号肽,将目的基因分别亚克隆于p VAX1真核表达载体,得到Ag85a/p VAX1、Ag85b/p VAX1、Ag85a-Esat6/p VAX1和Ag85b-Esat6/p VAX1四种质粒;经酶切和测序鉴定正确后,质粒转染COS-7细胞4