【摘 要】
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目的克隆小鼠抗人S100A9单克隆抗体(mAb)可变区基因并对其序列进行分析。方法从分泌小鼠抗人S100A9mAb的杂交瘤细胞株(ⅡD4B10)中提取RNA,采用逆转录PCR扩增出轻链可变区基因
【机 构】
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河南中医药大学中医药免疫学实验室;
【基金项目】
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2015年度河南省科技创新人才计划科技创新杰出青年项目(154100510019);河南中医学院省属高校基本科研业务专项(2014KYYWFZZCX3-06)
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目的克隆小鼠抗人S100A9单克隆抗体(mAb)可变区基因并对其序列进行分析。方法从分泌小鼠抗人S100A9mAb的杂交瘤细胞株(ⅡD4B10)中提取RNA,采用逆转录PCR扩增出轻链可变区基因VL和重链可变区基因VH,并对VL和VH进行克隆测序与BLAST同源性比较分析。结果小鼠抗人S100A9 mAb VL基因编码区291 bp,编码97个氨基酸,属于IGKV14-111*01家族;VH基因编码区324 bp,编码108个氨基酸,属于IGHV1-80*01家族。所获取的VH和VL序列有明显抗体可变区特征,具有骨架区和互补决定区。结论获得鼠抗人S100A9 mAb的重链和轻链可变区基因,为构建基因工程抗体奠定基础。
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