质粒pACYC184电转化松材线虫携带的荧光假单胞菌GcM5-1A

来源 :应用与环境生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liu55166
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以质粒pACYC184为材料,研究了松材线虫携带的荧光假单胞菌的最适电转化条件.结果表明,荧光假单胞菌GcM5-1A培养至D600nm为0.5时制备感受态细胞,以300mmol/L蔗糖溶液为电击缓冲液,质粒DNA终浓度为0.01ng/μL,在25μF电容、9kV/cm电场强度、200n电阻的电击条件下电击一次,可得最大的电转化效率,即5.5×10^6/μg(DNA).SDS—PAGE分析显示,转化质粒pACYC184的氯霉素抗性基因在受体细胞内得到了表达.本方法的建立为松材线虫携带的荧光假单胞菌
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