【摘 要】
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目的采用GatewayTM技术构建人Rb94基因重组腺病毒载体（Ad-hRb94）。方法从人类胚胎中提取总RNA,经反转录得到目的 cDNA,PCR扩增Rb94目的基因片段。设计含有attB侧翼序列的引物,
【机 构】
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中国医学科学院放射医学研究所、天津市分子核医学重点实验室
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目的采用GatewayTM技术构建人Rb94基因重组腺病毒载体（Ad-hRb94）。方法从人类胚胎中提取总RNA,经反转录得到目的 cDNA,PCR扩增Rb94目的基因片段。设计含有attB侧翼序列的引物,用于重组片段的PCR扩增,在BP重组酶的作用下,将含attB位点的PCR产物与受体载体pDONRTM221发生重组反应,产生入门克隆。在LR重组酶作用下,将入门克隆与带attR1、at-tR2位点的目的载体Ad/CMV/V5-DEST体外重组形成表达克隆Ad-hRb94。经PCR和测序鉴定,将Ad-hR
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