【摘 要】
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采用RT-PCR方法从Ⅰ型鸭肝炎病毒ZJ-Ⅴ株中扩增VP3基因,运用DNAStar软件对VP3序列与参考序列的同源性进行比对,并进行了遗传进化分析,然后将VP3基因克隆至原核表达载体pET-32
【机 构】
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江西农业大学动物科技学院,中国农业科学院上海兽医研究所,甘肃农业大学动物医学院
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(31101848,31270194);公益性农业科研专项(201003012);“863”计划(2011AA10A200);中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(2012JB06,2012JB13)
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采用RT-PCR方法从Ⅰ型鸭肝炎病毒ZJ-Ⅴ株中扩增VP3基因,运用DNAStar软件对VP3序列与参考序列的同源性进行比对,并进行了遗传进化分析,然后将VP3基因克隆至原核表达载体pET-32a（＋）,获得重组表达质粒pET-VP3,转化宿主菌E.coli Rosetta（DE3）,经1mmol/L IPTG诱导表达后用SDS-PAGE和Western blotting方法对表达产物进行检测。结果显示,成功克隆了DHV-ⅠVP3基因,片段大小为711bp。序列分析结果表明,ZJ-Ⅴ株VP3与其他A型DH
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