反转录聚合酶链式反应定量分析Ⅰ型脱碘酶的mRNA

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Ⅰ型脱碘酶(ID Ⅰ)是一种含硒酶,它在甲状腺激素代谢中起重要作用.本实验建立了利用RT-PCR并以β-肌动蛋白(β-Actin)为内参照定量分析IDⅠ mRNA表达的方法.提取肉鸡肝脏总RNA,经反转录和PCR扩增,PCR产物的电泳条带于VDS摄象系统扫描灰度.寻求PCR线性扩增范围,确定RT-PCR的最佳循环次数和模板量.通过计算IDⅠPCR产物与β-Actin PCR产物的灰度之比,即可得出IDⅠ mRNA的相对含量.
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