靶向CrkL基因的siRNA真核表达载体的构建及对H9C2心肌细胞凋亡的作用

来源 :生命科学研究 | 被引量 : 0次 | 上传用户:junwen2009
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为研究CrkL基因在心肌细胞中的作用机制提供实验基础,首先体外合成6个针对大鼠CrkL基因的特异反义脱氧寡核苷酸序列,定向克隆至pSR-GFP/neo siRNA真核表达质粒中,经双酶切和测序证实重组载体pSR-GFP/neo-CrkLi构建成功.然后将其转染入大鼠H9C2心肌细胞内,用荧光显微镜观察其转染率,RT-PCR法鉴定其对CrkL mRNA表达的抑制作用.流式细胞仪检测转染前后H9C2细胞凋亡率.所有pSR-GFP/neo-CrkLi载体均能高效率的转染H9C2细胞,但只有3个载体能显著抑制Cr
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