细菌内同源重组法构建HBV S区和C区基因非复制型腺病毒栽体及其体外表达

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目的:构建表达乙肝病毒表面抗原(HBsAg)和e抗原(HBeAg)的非复制型重组腺病毒载体,并检测他能否在真核细胞中有效表达目的基因.方法:扩增乙肝病毒(HBV)前S2/S基因和前C/C基因片段,分别亚克隆到腺病毒穿梭质粒pAdTrack—CMV上,与5型腺病毒骨架质粒pAdeasy—1共转染BJ5183细菌,经细菌内同源重组产生分别携带HBV S区和C区基因的重组腺病毒载体pAd—HBs和pAd—HBe,经脂质体法转化293细胞包装产生重组腺病毒Ad—HBs和Ad—HBe;体外转染293和Vero细胞,
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