【摘 要】
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目的 建立一种快速、准确、特异定量检测炭疽杆菌的方法。方法 根据复合探针荧光定量分析原理 ,以炭疽杆菌染色体rpoB基因为靶序列 ,设计合成引物和探针 ,对炭疽杆菌进行实
【机 构】
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军事医学科学院放射医学研究所; 军事医学科学院放射医学研究所 100850北京; 100850北京; 100850北京;
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目的 建立一种快速、准确、特异定量检测炭疽杆菌的方法。方法 根据复合探针荧光定量分析原理 ,以炭疽杆菌染色体rpoB基因为靶序列 ,设计合成引物和探针 ,对炭疽杆菌进行实时定量聚合酶链反应 (PCR)检测 ,并探讨荧光探针与淬灭探针用量及比例、镁离子浓度、淬灭探针长度对定量结果的影响。结果 本法最适条件 :荧光探针浓度 30 0nmol/L、荧光探针与淬灭探针的比例为1/ 2 ,镁离子浓度为 3mmol/L ,淬灭探针长 15个核苷酸 ,该法检测炭疽杆菌的灵敏度达 10 3 拷贝 ,能特异区分炭疽杆菌与其他蜡样杆菌。结论 复合探针荧光定量PCR技术能够快速准确、特异、敏感地对炭疽杆菌进行定量分析 ,可为临床诊断提供帮助。
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