基于“肾主骨”理论研究金匮肾气丸调控AGEs/RANKL/NF-κB通路对糖尿病性骨质疏松症小鼠的影响

来源 :中国实验方剂学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lijie04113209
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目的:基于“肾主骨”理论研究金匮肾气丸通过调控晚期糖基化终产物(AGEs)/核转录因子-κB受体激活剂(RANKL)/核因子κB(NFκB)(AGEs/RANKL/NFκB)通路对糖尿病性骨质疏松症(DOP)小鼠的影响。方法:选取40只6周龄骨骼肌特异性胰岛素样生长因子-1受体功能缺失(MKR)小鼠,雌雄对半,高脂饲料喂养8周建立DOP模型,将造模成功的小鼠随机分成模型组、金匮肾气丸低(1.3 g·kg-1)、高剂量组(2.6 g·kg-1)和阿仑膦酸钠组(0.01 g·kg-1),每组10只;另取10只同龄FVB/N小鼠为正常组。各给药组分别予以相应药物灌胃,每日1次,连续4周。给药结束后,各组小鼠行空腹血糖(FBG)检测和口服糖耐量实验(OGTT);检测小鼠肾功能和肾指数;采用苏木素-伊红(H&E)染色和马松(Masson)染色观察肾脏组织病理学变化;免疫组织化学检测小鼠肾脏组织AGEs、磷酸化核因子κB(p-NFκB)和RANKL蛋白表达水平;采用蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测肾脏组织AGEs/RANKL/NFκB通路相关蛋白和股骨组织中骨保护素(OPG)、Runt相关转录因子2(RUNX2)蛋白的表达。结果:与正常组相比,模型组小鼠空腹血糖显著升高(P<0.01),骨小梁退变,骨形态参数指标异常,OGTT的曲线下面积 (AUC)显著升高(P<0. 01),肾脏体积增大,肾功能指标、肾指数升高(P<0.01),肾小球、肾小管结构紊乱,肾脏组织AGEs、RANKL表达和p-NFκB/NFκB比值明显升高(P<0.05),股骨组织中OPG和RUNX2表达降低(P<0.01);与模型组相比较,金匮肾气丸各剂量组小鼠OGTT的AUC显著降低(P<0.01),组织病理分析示,肾小球和肾小管的结构病变缓解,肾脏组织AGEs、RANKL的表达和p-NFκB/NFκB比值明显降低(P<0.05, P<0.01),股骨组织中RUNX2和OPG表达显著升高(P<0.05, P<0.01)。结论:金匮肾气丸可通过改善肾功能,下调AGEs/RANKL/NFκB信号通路抑制炎性反应,进而缓解DOP小鼠骨质疏松症状,起到从肾论治DOP的作用。
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