犬传染性肝炎病毒Ⅸ基因的克隆及原核表达

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【摘要】

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通过对犬传染性肝炎病毒(CAV-I)基因组的提取,PCR扩增获得了大小为1109bp CAV-I病毒结构Ⅸ基因片段,成功地将Ⅸ基因克隆至载体pMD-18T中,构建了pⅨ原核表达载体pGEX-4T1-Ⅸ,

【作者】

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杨拓张洋孟焕徐春瑛袁宝文力正陈承祯任文陟陈健

【机构】

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吉林大学畜牧兽医学院,吉林大学试验动物中心

【出处】

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中国农学通报

【发表日期】

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2004年期

【关键词】

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犬传染性肝炎病毒 Ⅸ 基因 Ⅸ 蛋白原核表达

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通过对犬传染性肝炎病毒(CAV-I)基因组的提取,PCR扩增获得了大小为1109bp CAV-I病毒结构Ⅸ基因片段,成功地将Ⅸ基因克隆至载体pMD-18T中,构建了pⅨ原核表达载体pGEX-4T1-Ⅸ,将重组质粒pGEX-4T1-Ⅸ转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,并实现了Ⅸ基因在该菌中的高效表达.对表达产物进行了Western blot检测,分析结果表明表达蛋白能与抗CAV-I阳性血清发生特异性的抗原-抗体反应,为CAV-I的血清学诊断和免疫监测提供大量优质的抗原奠定了基础.

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