神经干细胞原代培养及GABA能神经元的诱导分化

来源 :中华神经外科疾病研究杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:y5603179
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目的 探讨神经干细胞的原代培养及γ 氨基丁酸 (GABA)能神经元的诱导分化。方法 取孕 16dWistar大鼠的胚鼠全脑 ,进行体外培养 ,并对培养的神经干细胞以及诱导分化的GABA能神经元进行鉴定。结果 培养 2 4h后 ,出现 2~ 4个细胞的细胞球。分化 2d后 ,神经球贴壁后伸出细长突起 ,并可和周边神经球伸出的突起连接。神经球周边可见大量散在贴壁的双极或多极细胞。免疫荧光染色可见神经球均有nestin、NF2 0 0、GFAP阳性细胞。取第 3代神经球行GABA能神经元定向分化。分化 2 4h后 ,实验组细胞球贴壁。 3d后 ,实验组细胞球周边有大量散在分布细胞贴壁生长 ,胞体圆形较大 ,有 1~ 2个细长突起。免疫荧光显示 ,实验组周边散在的贴壁细胞多为GAD6 5阳性细胞。GAD6 5阳性细胞分化率实验组 (85 .97± 2 .78) %、对照组 (18.16± 2 .2 9) % ,P <0 .0 1。结论本实验利用寡核苷酸序列特异性阻断了bHLH基因家族的调控因子之一Hes1,解除了其对bHLH的抑制 ,促进了神经干细胞向神经元的分化。实验还发现 ,阻断Hes1后大大提高了神经干细胞向GA BA神经元分化的比率。
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